核心观点
本研报描述了一种名为 REACTIV 的快速雌激素活性体内测试方法,该方法利用转基因日本鳊(Oryzias latipes)的 Eleutheroembryos(ELE0)进行测试,以识别对雌激素轴产生作用的化学品。
关键数据
- 测试物种:转基因日本鳊(Oryzias latipes)的 Eleutheroembryos(ELE0),携带 chgh-gfp 基因构建体。
- 测试方法:将 Eleutheroembryos 放入 6 孔板中,在存在或不存在 30 μg/L 测试睾酮(T)的条件下,暴露于不同浓度的待测化学品中。
- 测试指标:通过荧光显微镜测量 Eleutheroembryos 肝脏中的绿色荧光蛋白(GFP)荧光强度。
- 测试持续时间:24 小时,光照周期为 14 小时光照和 10 小时黑暗。
- 测试验证:通过国际间实验室验证研究,使用 18 种单一成分化学品进行测试,验证了该方法的可靠性和有效性。
研究结论
- 测试原理:chgh-gfp 基因构建体中的 choriogénine H 启动子受雌激素轴信号通路的调控,其表达可被雌激素受体(ER)直接激活或间接通过影响雌激素的可用性来调节。
- 测试范围:可检测多种作用机制的化学品,包括雌激素受体激动剂(ER 激动剂)、选择性雌激素受体调节剂(SERM)、芳香化酶抑制剂、需要代谢激活的化学品等。
- 测试局限性:无法区分不同的作用机制,只能判断化学品是否总体上对雌激素轴起激活或抑制作用;不能检测通过非基因组途径影响 ER 信号通路的化学品。
- 测试应用:可作为筛选潜在雌激素轴活性化学品的快速、高效的工具。