493号论文：直接研究体外抗雌激素受体重组人（hrER）对雌激素受体亲和力物质的保护作用

récepteur d’oestrogène recombinanthumain (hrER) pour la détection dessubstances ayant une affinité deliaison avec les récepteurs des oestrogènes25 juin 2024Lignes directrices de l’OCDE pour les essaisde produits chimiques OECD/OCDEL'OCDE autorise l'utilisation de ce contenu aux conditions décrites sur le site :http://www.oecd.org/fr/conditionsdutilisation.1LIGNE DIRECTRICE DE L’OCDE POUR LES ESSAISDE PRODUITS CHIMIQUESLigne directrice axée sur la performance pour les essais in vitro faisant appel aurécepteur d’œstrogène recombinant humain (hrER) pour la détection dessubstances ayant une affinité de liaison avec les récepteurs des œstrogènesLigne directrice pour les essais axée sur la performanceLa présente Ligne directrice pour les essais axée sur la performance (LDAP) décrit la méthodologiedes essaisin vitrofaisant appel au récepteur d’œstrogène recombinant humain pour la détection dessubstances ayant une affinité de liaison avec les récepteurs des œstrogènes (essais de liaison au hrER).Elle comprend deux méthodes d’essaistructurellement et fonctionnellement similaires pour détecter lesligands des récepteurs des œstrogènes (ERα), et doit faciliter l’élaboration de nouvelles méthodes similairesou modifiées, conformément aux principes de validation exposés dans le documentd’orientation de l’OCDEintituléGuidance Document on the Validation and International Acceptance of New or Updated Test Methodsfor Hazard Assessment(1). Les méthodes d’essai de référence suivantes (annexes2 et3) sont entièrementvalidées et constituent la base de la présente LDAP:•Essai de Freyberger-Wilson (FW) : essaiin vitrode liaison aux récepteurs des œstrogènes (ER) àl’aide d’un ERαhumain intégral (2), et•Essai du Chemical Evaluation and Research Institute (CERI): essaiin vitrode liaison aux récepteursdes œstrogènes à l’aide du domaine de liaison du ligand d’un ER recombinant humain (2).Des normes de performance (3) sont disponibles afin de faciliter l’élaboration et la validation de méthodesd’essai similaires visant le même paramètre de sécurité, et de permettre de modifier cette LDAP en tempsopportun, en vue d’ajouter de nouvelles méthodes d’essai similaires à la LDAP mise à jour. L’ajout denouvelles méthodes d’essai similaires n’est toutefois possible qu’après examen et approbation eu égard aurespect de ces normes de performance. Chacune des méthodes d’essai incluses dans la présente Lignedirectrice est susceptible d’être choisie et mise en œuvre pour répondre aux exigences nationales enmatière d’essai de liaison auxER dans le cadre du système d’acceptationRappel des faits et principes relatifs aux méthodes d’essai incluses dans la présente LDAPL’OCDE a lancé en 1998 une activité à caractère hautement prioritaire visant à réviser les lignesdirectrices existantes ou à établir de nouvelles lignes directrices concernant le dépistage et l’essai dessubstances susceptibles d’avoir des effets perturbateurs sur le système endocrinien. Le Cadre conceptuelde l’OCDE pour les essais et l’évaluationdes perturbateurs endocriniens (CC) a été révisé en2012. Lesversions originale et révisée de ce CC figurent en tant qu’annexes dans le document d’orientation sur lesLignes directrices normalisées pour évaluer l’effet perturbateur des produits chimiquessur le systèmeendocrinien (4). Le CC comprend cinq niveaux, chacun d’entre eux correspondant à un degré différent de ©OCDE (2024)INTRODUCTION GÉNÉRALEmutuelle de données. 1.2. OECD/OCDE2complexité biologique. Les essais de liaison aux ER décrits dans cette LDAP correspondent au niveau2, quicouvre «les essais in vitro fournissant des données sur certains mécanisme(s)et voie(s)d’activitéendocrinienne».La présente LDAP vise les méthodes d’essai de liaison aux récepteursin vitroconçues pourdétecter les ligands du récepteur des œstrogènes alpha (ER) chez l’humain.La pertinence de l’essai de liaison aux ERin vitroà l’égard des fonctions biologiques a été clairementdémontrée. Les essais de liaison aux ER sont conçus pour détecter les produits chimiques susceptibles deperturber les voies d'activité liées à l’hormone œstrogène. Cela fait vingt ans qu’ils sont largement utiliséspour caractériser la distribution tissulaire des ER et pour déterminer les agonistes et les antagonistes de cesrécepteurs. Ces essais reposent sur l’interaction ligand-récepteur, qui constitue la première étape de la voiede signalisation des œstrogènes, essentielle aux fonctions reproductives chez l’ensemble des vertébrés.L’interaction des œstrogènes et des ER peut affecter la transcription des gènes régulés par lesœstrogènes et avoir desconséquences au-delà du génome en entraînant l’induction ou l’inhibition deprocessuscellulaires,notamment les mécanismes nécessairesàla prolifération cellulaire,audéveloppement normal du fœtus et aux fonctions reproductives (5) (6) (7). La perturbation des systèmesœstrogéniques normaux pourrait déclencher des troubles du développement (ontogenèse) et nuire à lasanté génésique et à l’intégrité du système