第442C号论文：化学中的皮肤敏感性：在有毒气体中建立与受保护物质的共价联系的重要性

l’établissement d’une liaison covalente avecles protéines, dans la voie toxicologiqueimpliquée dans les effets indésirables25 juin 2024Lignes directrices de l’OCDE pour les essaisde produits chimiques OECD/OCDEL'OCDE autorise l'utilisation de ce contenu aux conditions décrites sur le site :http://www.oecd.org/fr/conditionsdutilisation.LIGNE DIRECTRICE DE L’OCDE POUR LES ESSAIS DEPRODUITS CHIMIQUESEssais de sensibilisation cutanée in chemicoportant sur l’événement clérelatif à l’établissement d’une liaison covalente avec les protéines, dans la voietoxicologique impliquée dans les effets indésirablesLigne directrice d’essai fondé sur l’événement clé relatif àl’établissement d’une liaisoncovalente avec les protéinesUn sensibilisant cutané est une substance qui provoque une réponse allergique suite à un contactrépété avec la peau, selon la définition du Système général harmonisé de classification et d’étiquetage desproduits chimiques des Nations Unies (SGH de l’ONU)(1). Les principales phases du processus biologiquedesensibilisation cutanée font l’objet d’un consensus général.Les connaissances dont on disposeactuellement sur les mécanismes chimiques et biologiques associés à la sensibilisation cutanée sont résuméessous la forme d’une voie toxicologique impliquée dans les effets indésirables (AOP, Adverse OutcomePathway)(2) allant d'un événement moléculaire initiateur jusqu’aux effets indésirables sur la santé que sontles dermatites de contact allergiques, en passant par des étapes intermédiaires. Cette AOP concerne lesproduits chimiques qui réagissent avec les résidus d’acides aminés (donc avec la cystéine ou la lysine), telsque les produits organiques. Dans le cas présent, l’événement moléculaire initiateur (le premier événementclé) est l’établissement d’une liaison covalente entre des substances chimiques électrophiles et les centresnucléophiles des protéines de la peau. Le deuxième événement cléde l’AOP se déroule dans les kératinocyteset comprend des réponses inflammatoires et des changements d’expression génique, liés à des voies designalisationcellulaire spécifiques telles que les voies dépendant de l’élément de réponseantioxydant/électrophile (ARE, Antioxidant Response Element). Le troisième événement clé est l’activationdes cellules dendritiques, habituellement évaluée d’après l’expression de marqueurs de surface spécifiquesde la cellule, les chimiokines et les cytokines. Le quatrième événement clé est la prolifération desTraditionnellement, l’évaluation de la sensibilisation cutanée a fait appel à l’expérimentationanimale. Les méthodes classiques, pratiquées sur des cobayes–test de maximisation chez le cobaye (GPMT)de Magnusson et Kligman et test de Buehler (LD406 de l’OCDE)(11)–, évaluent les phases d’induction etd’élicitation de la sensibilisation cutanée. Les essais chez la souris–l’ELGL (LD429 de l’OCDE)(12) etses trois variantes n’utilisant pas d’isotopes radioactifs, l’ELGL: DA (LD442A de l’OCDE)(13) ainsi quel’ELGL: BrdU-ELISA et BrdU-FCM (LD442B de l’OCDE)(14)–évaluent la réponse exclusivement austade de l’induction. Ces essais se sont imposés, car ils présentent l’avantage, par rapport aux essais sur lecobaye, de préserver davantage le bien-être animal et de fournir une mesure objective de la phase d’inductionde la sensibilisation cutanée. 442CAdoptée :20juin 2022Corrigée: 25 juin 2024 © OCDE (2024)INTRODUCTION1.lymphocytesT.2. OECD/OCDE© OCDE (2024)3.Les méthodes mécanistiques d’essaiinchemicoetinvitroportant sur les trois premiers événementsclés de l’AOP sensibilisation cutanée ont été adoptées afin d’aider à évaluer le potentiel de sensibilisationcutanée des produits chimiques: la présente Ligne directrice évalue l’établissement d’une liaison covalenteavec les protéines et porte sur le premier événement clé; la LD442D de l’OCDE évalue l’activation deskératinocytes(15), correspondant au deuxième événement clé, tandis que la LD442E de l’OCDE s’intéresseà l’activation des cellules dendritiques(16), troisième événement clé de l’AOP sensibilisation cutanée. Enfin,le quatrième événement clé, qui se traduit par la prolifération des lymphocytesT, est évalué indirectementpar l’essai de stimulation locale des ganglions lymphatiques (ELGL) chez la souris(12).Fondements et principes des méthodes d’essai incluses dans la Ligne directrice d’essaifondé sur les événements clés4.La présente Ligne directrice (LD) décrit les essaisinchemicoportant sur les mécanismes dupremier événement clé de l’AOP sensibilisation cutanée, à savoir l’établissement d’une liaison covalenteavec les protéines(2). Cette LD comprend des méthodes d’essai utilisées pour aider à distinguer lessensibilisants des non-sensibilisants cutanés, selon le SGH de l’ONU(1).Elle décrit actuellement deuxméthodes d’essai:•L’essai de liaison directe sur la réactivité peptidique (Direct Peptide Reactivity Assay, DPRA)(appendiceI),•L’essai de réactivité à des dérivés d’acides aminés (Amino acid Derivative Reactivity Assay,ADRA) (appendiceII),•L’e