核心观点
本指南描述了三种体外测试方法，用于评估化学物质致敏潜能的第二关键事件——角质形成细胞激活。这些方法基于毒理学通路，涉及化学物质与皮肤蛋白质的共价结合，以及随后引发的炎症反应和基因表达变化。
测试方法
- ARE-Nrf2荧光素酶KeratinoSensTM方法：该方法利用包含报告基因荧光素酶的细胞系，通过检测ARE-Nrf2通路相关基因的诱导来评估角质形成细胞激活。该方法已被确认为科学上有效的参考方法（MRV），并可用于区分致敏物和非致敏物。
- ARE-Nrf2荧光素酶LuSens方法：该方法与KeratinoSensTM类似，但使用不同的细胞系和报告基因。它也已被证明是科学上有效的，并可用于IATA策略中。
- EpiSensA方法：该方法通过定量EhR模型上ATF3、IL-8、GCLM和DNAJB4等基因表达标志物的变化来评估角质形成细胞激活。该方法也已被证明是科学上有效的，并可用于IATA策略中。
应用和局限性
这些方法可用于IATA策略中，与其他信息来源的数据相结合，以帮助区分致敏物和非致敏物。然而，它们不能单独用于分类致敏物，也不能预测致敏物的强度。
- 适用性：这些方法适用于多种化学物质，包括不同官能团、反应机制、致敏强度和理化性质的物质。
- 局限性：这些方法可能无法检测到所有类型的致敏物，例如仅对赖氨酸具有反应活性的物质或需要酶促活化的前体物质。此外，它们也不能完全模拟人体皮肤的情况。
数据解读和报告
每个方法都有一套详细的指导原则，包括实验操作步骤、数据评估标准和报告格式。结果应结合其他信息来源进行综合评估，以得出关于化学物质致敏潜能的结论。
研究结论
这些体外测试方法为评估化学物质致敏潜能提供了重要的工具，并有助于减少动物实验的需求。然而，它们不能完全替代动物实验，因为它们可能无法模拟人体皮肤的情况。因此，在使用这些方法时，应结合其他信息来源进行综合评估。
