试验编号 442E: 体外皮肤致敏

Section4 健康影响 测试指南编号442E 体外皮肤致敏 体外皮肤致敏试验解决皮肤不良结局途径中树突状细胞活化的关键事件 增感 2024年6月25日 化学品 通过： 2022年6月 30日 更正：2024年6月25日 经合组织化学品试验指南 体外皮肤致敏试验解决树突状细胞活化的不良结局途径关键事件 一般介绍 基于关键事件的树突状细胞激活试验指南 1.皮肤致敏剂是指联合国全球化学品统一分类和标签制度(UNGHS)(1)所定义的皮肤接触后会导致过敏反应的物质 。关于皮肤致敏的关键生物学事件存在普遍的共识。与皮肤致敏相关的化学和生物学机制的当前知识已被总结为不良结果途径（AOP）（2），从分子启动事件开始，直至不良反应的中间事件，即过敏性接触性皮炎。在这种情况下，分子引发事件（i。Procedres.第一个关键事件）是亲电子物质与皮肤蛋白中的亲核中心的共价结合。该AOP中的第二个关键事件发生在角质形成细胞中，包括炎症反应以及与特定细胞信号传导途径（例如抗氧化剂/亲电反应元件（ARE）依赖性途径 ）相关的基因表达变化。第三个关键事件是树突细胞(DC)的活化,通常通过特定细胞表面标记、基因组转录物、趋化因子和细胞因子的表达来评估。第四个关键事件是T细胞活化和增殖,其在鼠局部淋巴结测定(LLNA)中间接评估(3)。 2.该测试指南(TG)描述了体外测定,其解决了在关于激活AOP的树突细胞用于皮肤致敏的关键事件(2)下描述的机制,TG包括用于支持根据UUNGHS(1)区分皮肤致敏剂和非致敏剂的测试方法。 本TG中描述的测试方法是： 人细胞系活化试验(h-CLAT) U937细胞系激活测试(U-SENS™) 白细胞介素-8报告基因测定(IL-8Luc测定) 基因组过敏原快速检测（GARD™），用于评估皮肤致敏剂（GARD™皮肤） ©OECD（2024） 您可以根据http://www.oecd.org/termsandconditions/上提供的条款和条件自由使用本材料 基于关键事件的测试指南中包含的测试方法的背景和原则 3.皮肤致敏的评估通常涉及使用实验动物。使用豚鼠的经典方法，Magsso和Kligma的豚鼠最大化测试（GPMT）和Behler测试（TG406）（4）评估了皮肤致敏的诱导和激发阶段。鼠类测试，LLNA（TG429）（3）及其两个非放射性修饰，LLNA：DA（TG442A）（5）和LLNA：BrdU-ELISA（TG442B）（6），都仅评估了诱导反应 ，并且也获得了接受，因为它们在动物福利方面比豚鼠测试具有优势，并且客观地测量了皮肤致敏的诱导阶段。 4.针对皮肤致敏AOP的第一个关键事件（OECDTG442C（7））和第二个关键事件（OECDTG442D（8 ））的基于机械的化学和体外测试方法已被采用，以有助于评估化学品的皮肤致敏危害潜力。 5.据报道，皮肤致敏剂除了诱导促炎细胞因子，如IL-1β和TNF-α，以及几种趋化因子，包括IL-8（CXCL8）和CCL3（9）（10）（11）（12），与DC活化有关（2），还诱导细胞膜标志物，如CD40，CD54，CD80，CD83和CD86的表达。在该TG中描述的测试方法定量细胞、表面标志物CD54和CD86、细胞因子IL-8或与暴露于致敏剂后的单核细胞和DC的活化过程相关的一系列基因(基因组生物标志物特征)的表达变化。 6.然而,由于DC激活仅代表皮肤致敏AOP(2)(13)的一个关键事件,因此用单独测量DC激活的标记物的测试方法产生的信息可能不足以作为独立方法来推断化学品的皮肤致敏潜能的存在或不存在。因此，建议使用本测试指南中描述的测试方法生成的数据来支持皮肤致敏剂之间的区分（i。Procedres.UNGHS类别1）和在综合测试和评估方法（IATA）中使用时的不敏感者，以及其他相关补充信息，e。Procedre来自解决皮肤致敏AOP的其他关键事件的体外测定以及非测试方法，包括计算机模拟建模和从化学类似物读取（13）。在定义的方法中使用这些方法生成的数据的示例，i。Procedres.与所使用的信息源集和应用于数据以得出预测的程序相关的标准化方法已经发表(13),并在OECDTG中实施了关于定义的皮肤致敏方法(14).如果意图是在定义的皮肤致敏方法中使用来自这些方法的数据,则参考测试指南497以应用边界标准或其他数据解释程序(14)。有关边界标准应用的详细信息，请参阅附件1，图1。 7.本测试指南中包含的测试方法可能在程序，适用性领域和局限性方面有所不同，但均可用于满足各国对AOP树突状细胞活化关键事件测试结果的要求，同时受益于OECD对数据的相互接受。在定义方法（DA）的上下文中，方法不能自动互换；在TG497中指定了应使用哪些方法/方法组合。 8.本测试指南中描述的测试方法不能单独使用，既不能将皮肤致敏剂细分为UNGHS（1）定义的1A和1B子类别 ，也不能为实施这两个可选的子类别的当局预测安全性评估决定的效力。然而，根据监管框架，这些方法产生的积极结果可以单独用于将化学品分类为联合国全球统一制度第1类。 9.本测试指南中使用的术语“测试化学品”是指正在测试的内容1并且与测试方法对单成分物质、多成分物质和/或混合物的测试的适用性无关。目前，有关测试方法对多成分物质/混合物的适用性的信息有限（15）（16）。然而,测试方法在技术上适用于多成分物质和混合物的测试。当考虑测试混合物时，难以测试的化学品(例如Procedre不稳定），或者在本指南中描述的适用性范围内测试化学品，应预先考虑此类测试的结果是否会产生科学上有意义的结果。此外，当测试多成分物质或混合物时，应考虑细胞毒性成分对观察到的反应的可能干扰。 LITERATURE 1.联合国联合国（2015年），全球化学品统一分类和标签制度（GHS）。第六修订版。纽约和日内瓦：联合国出版物。ISBN：978-92-1-117006-1。可用at:[https://www.unec.org/trans/danger/publi/ghs/ghs_rev06/06files_e.html]。 2.OECD(2012),Theadverseoutcomepathforskinsensitisationinitiatedbycovalentbindingtoproteins.Part1:ScientificEvidence.SeriesonTestingandAssessmentNo.168.availableat:http://www.oecd.org/officialdocumentpdf/?cote=ENV/? 3.OECD(2010),TheLocalLymphNodeAssay.OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.429,OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment,Paris.Availableat:http://www.oecd.org/env/testguidelines 4.OECD(1992),SkinSensitisation.OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.406,OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment,Paris.Availableat:http://www.oecd.org/env/testguidelines 5.OECD(2010),SkinSensitisation:LocalLymphNodeAssay:DA.OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.442A,OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment,Paris.Availableat:http://www.oecd.org/env/testguidelines 6.OECD(2010),Skinsensitisation:LocalLymphNodeAssay:BrdU-ELISA.OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.442B,OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment,Paris.Availableat:http://www.oecd.org 7.OECD(2015),OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.442C:InChemicoSkinSensitisation:DirectPeptideReactivityAssay(DPRA).Paris,France:OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment.Availableat:http://www.oecd.org 8.OECD(2015),OECDGuidelinefortheTestingofChemicalsNo.442D:InvitroSkinSensitisation:ARE-Nrf2荧光素酶TestMethod.Paris,France:OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment.Availableat:http:/ /www.oecd.org/env 9.SteinmanRM。1991。树突状细胞系统及其在免疫原性中的作用。AnnuRevImmunol9:271-96。 10.CauxC、VanbervlietB、MassacrierC、AzumaM、OkumuraK、LanierLL和BanchereauJ.1994。B70 /B7-2与CD86相同，是在人树突状细胞上表达的CD28的主要功能配体。JExpMed180:1841-7。 11.AibaS,TerunumaA,ManomeH,andTagamiH.1997.Dendriticcellsdifferentiallyresponsetohaptensandillitantsbytheirproductionof细胞因子andexpressionofco-stimulatorymolecules.EurJImmunol27:3031-8. 12.AibaS、ManomeH、NakagawaS、MollahZU、MizuashiM、OhtaniT、YoshinoY和Tagami。H.2003.p38丝裂原活化蛋白激酶和细胞外信号调节激酶在两种代表性半抗原NiCl2和DNCB激活树突状细胞中起着不同的作用。JInvestDermatol120:390-8。 13.经合组织(2016年)。测试和评估系列编号256：关于皮肤致敏性测试和评估综合方法（IATA）中使用的定义方法和个人信息来源的报告的指导文件，附件1和附件2。ENV/JM/MONO（2016）29。经济合作与发展组织 ，巴黎。可在：[https://commity.OECD.org/commity/iatass]。 14.OECD.(2022).GuidelineNo.497:GuidelineonDefinedApproachesforSkinSensitisation.OrganisationforEconomicCooperationandDevelopment,Paris.Availableat:http://www.oecd.org/env/testguidelines 15.AshikagaT,SakaguchiH,SonoS,KosakaN,IshikawaM,NukadaY,MiyazawaM,ItoY,NishiyamaN,ItagakiH.(2010),体外皮肤致敏试验的比较评价:人细胞系激活试验(h-CLAT)与局部淋巴结