AAV生产细胞系应用的桥接研究：监管与开发视角

腺相关病毒（AAV）生产细胞系应用桥接研究：监管与发展视角 重要提示：本内容基于当前科学知识和监管先例，反映了龙沙（Lonza）主题专家的观点，并不构成正式的监管指南。 腺相关病毒（AAV）生产细胞系应用桥接研究：监管与发展视角 鲁棒性，这些工艺也受到固有规模限制的困扰。低产率和产生高水平的杂质，进一步被下游加工低效和产率损失所加剧。5 腺相关病毒(AAV)生产细胞系应用：监管与发展视角 生产细胞系有影响 ⁴稳定型腺相关病毒（AAV）生产细胞系（PCL）提供了一种根本不同的制造模式。通过消除质粒转染的需求，基于PCL的工艺简化了供应链，降低了原材料成本，并使工艺更类似于成熟生物制剂（例如：单克隆抗体、重组蛋白等）所使用的工艺。稳定型PCL有望提供更佳的批次间一致性，支持可扩展的悬浮工艺，并以显著更低的成本生产高质量AAV载体。 为什么AAV制造必须发展 腺相关病毒（AAV）载体已展现出明确的临床潜力，在美国、欧洲及其他地区已有多种体内基因疗法获得监管机构批准。¹ 直到目前为止，低产率和工艺复杂性是可以接受的，因为获批的AAV产品主要针对罕见或超单基因遗传病，患者群体有限，且剂量要求稀少。 因此，整个行业正日益关注从瞬时转染转向基于PCL的制造——但这一转型涉及重要的监管和发展考量。 然而，基于AAV的数百项基因疗法正在推进临床开发，其中包括针对更常见疾病的项目，这些疾病需要更高剂量、重复给药或更广泛的患者准入。² ， ³ 对于这些适应症而言，制造效率、一致性和可扩展性是商业可行性的关键使能因素。因此，高昂的生产成本和批次间差异不仅被视为制造挑战，更已成为阻碍患者准入和产品长期可行性的潜在障碍。² 一项制造工艺变更，而不仅仅是材料变更 将瞬时转染切换至用于AAV生产的 producer 细胞系，必须被视为生产工艺变更，而不仅仅是关键物料变更。ICH Q5E《生物技术/生物制品生产工艺变更的可比性》为国际公认指南，用于指导对生物制品生产工艺变更的监管评估。7 尽管目前尚无针对AAV的最终可比性指南，但欧洲药品管理局和美国食品药品监督管理局均发布了针对细胞和基因治疗产品的指南，其中明确引用了ICH Q5E原则。8,9 AAV生产中的许多成本和可变性挑战归因于瞬时转染，后者存在供应链和制造复杂性。⁴ ⁴瞬时转染依赖于大量符合GMP标准的质粒和转染试剂，这些试剂可能占生产总成本的很大一部分，同时还会引入与质粒质量、转染效率和工艺执行相关的批次间差异。此外，缺乏 腺相关病毒（AAV）生产细胞系应用桥接研究：监管与发展视角 在此框架下，开发者有责任评估流程变更是否可能影响产品质量、安全或功效，以及是否需要补充非临床或临床数据来支持持续开发。此项评估的一个核心要素是分析可比性，该要素由风险评估提供支持，并在必要时通过桥接研究加以验证。7-9 后期开发中的挑战。6. 由多克隆池产生的物质可用于早期毒性研究和开发或安全研究，一旦确定了表现最佳的克隆（体），即可优化该过程。如果转换发生在提交新药临床试验申请（IND）之前，通常可以根据分析数据来确定可比性。 重要的是，监管机构并不要求变更前后的产品完全一致。相反，必须证明产品高度相似，并且要证明所观察到任何差异对患者安全或治疗效果没有实质性影响。 若向PCL技术转移发生在第一阶段，则证明可比性的负担将增加。通常需要证明AAV基因治疗产品的安全性特征具有可比性，以及具备实现可重复生产结果的能力。因此，除了分析评估外，可能还需要进行截断毒性（临床前桥接）研究，以证明该变更未影响产品安全性。 可比性与桥梁研究：监管框架 分析可比性研究是确定是否需要开展额外非临床或临床衔接研究的基础。这些研究旨在评估与生产工艺转换相关的关键质量属性、效力、安全性和稳定性方面的潜在变化。6,7 除非开发者对类似产品或平台具有丰富的先前经验，否则分析可比性研究的结果通常需要与监管机构协商，以确定后续步骤。8,9 从瞬态PCL工艺转变为稳定PCL工艺，通常在第一阶段之后进行，往往会增加需要进行临床桥接研究的可能性。在某些情况下，该产品可能被视为一种新的基因疗法，需要提交新的IND申请。即使对作用机制有深入理解，并设计了完善的效价测定方法，在产品临床开发后期进行此类重大工艺变更也面临最高风险，因此需要生成大量可比性数据，通常包括临床桥接研究。 任何所需桥接研究的范围取决于工艺变更的性质以及其实施的临床开发阶段。由于开发后期引入的变更对既有的安全和有效性数据集构成更大风险，因此它们通常更有可能需要额外的支持数据。6-9 因此，建议尽可能在开发早期（至少在第一阶段研究期间早期）就切换到PCL工艺，以最大限度地减少可能需要进行的比较/桥接研究量。事实上，与瞬态工艺相比，PCL工艺的未来成本节约是尽早切换而非推迟切换的主要激励因素。 转换时机为何重要 除切换至PCL线路的时间外，其他因素也可能影响是否需要进行临床前和/或临床研究，包括疾病（罕见与常见）、剂量、给药途径以及患者群体（儿童与成人）。 理想情况下，最好在产品生命周期中尽早开始PCL细胞系开发工作。使用稳定细胞系生产临床前材料可以最大限度地减少未预料到的可比性风险。 腺相关病毒（AAV）生产细胞系应用桥接研究：监管与发展视角 需要重新评估剂量，除非通过适当的剂量寻找策略尽早解决，否则可能引发额外的非临床或临床研究。6 这一潜在问题强调了建立有意义的、资质合格的效价测定作为可比性工具箱一部分的重要性。 无论何时从瞬时转染转向基于PCL的过程，都强烈建议与相关卫生当局讨论产品可比性策略。 强大的分析功能作为 超越技术支持的合作 基础 可比性研究必须具有明确的理由、定义的策略，以及由全面且合适的稳健分析组合所支持的既定接受标准。对目标产品概况（TPP）的潜在影响应指导分析可比性评估的设计，以确保无论从瞬时转染切换到基于PCL的过程何时发生，对关键质量属性和稳定性的任何影响都能得到有效评估。确保收集到充分、准确、稳健的分析数据至关重要，因为这些信息用于支持决策制定，包括确定是否需要额外的临床前或临床桥接研究。 龙沙公司支持腺相关病毒（AAV）基因疗法项目，从概念阶段直至商业化生产，提供广泛的产品开发、制造和分析能力。我们认识到瞬时转染相关的经济和运营挑战，并致力于提供解决方案，在确保产品的高质量标准和法规合规性的同时提升效率。 凭借我们在生物制剂和病毒载体制造方面的丰富经验，龙沙公司将成熟的风险评估方法应用于AAV工艺变更。我们与客户紧密合作，确定过渡的最佳时机，设计高效且稳健的可比性策略，并生成开展监管讨论所需的数据。 分析比较研究应包含大量检测，这些检测远超传统放行检测范围，需包括扩展表征方法（如滴度、病毒蛋白（VP1、VP2、VP3）比例、衣壳蛋白翻译后修饰（PTMs）、遗传完整性、完整/空衣壳比例等）、相关的效价/感染性检测、稳定性研究（需证明在商业生产预期传代次数下性能保持一致），以及安全性评估）和残余杂质（宿主细胞DNA和宿主细胞蛋白、包装DNA、核酸酶、洗涤剂、诱导剂和增强剂试剂）。后者将需要开发新的检测方法，并建立科学依据来论证既定的接受标准。 Xcite® AAV稳定生产细胞系平台技术 为支持更高效、更具成本效益的腺相关病毒（AAV）制造，龙沙公司已开发出Xcite® AAV稳定生产细胞系平台技术。该技术已展示出从实验室规模到10升一次性生物反应器的可扩展工艺，根据病毒血清型和目标基因，可实现>1E+12病毒基因组/mL的产量，完整衣壳率超过30%，感染活性与瞬时工艺相当或更高。该技术已证明在多种基因和新型衣壳设计下，超过30代的传代过程中，生产力、基因组包装和感染活性均保持稳定。 虽然基于PCL的过程通常不被预期会改变生物活性，但生产力的提高或PTM谱的改变可能会影响效力。在特定情况下，更高的效力也可能 腺相关病毒（AAV）生产细胞系应用桥接研究：监管与发展视角 ®--licensing@lonza.comorpharma@lonza.comrespectively.在研发初期测试PCL技术的可行性可以实现最大价值。虽然从瞬时转染切换需要一些前期投入，但长期来看可以节省巨大的成本和时间。隆达的XciteAAV平台实际上支持整体加速发展时间表。该技术可通过研究许可和商业许可的方式，为寻求建立的组织提供部署。房子腺相关病毒（AAV）的生产或通过龙沙公司（Lonza）的委托PCL基础工艺开发获得以及制造服务。欲了解更多详情，请联系 参考文献 1.Barry J. Byrne 等人，“AAV介导的基因治疗的当前临床应用”，分子治疗 23(6), 2479–2516 (2025)。DOI: 10.1016/j.ymthe.2025.04.045。 免责声明 此处包含的信息据信是准确的。然而，无论明示或暗示，均不对其准确性或使用此类信息所获得的结果作出任何保证。龙沙公司对使用本白皮书免责，并声明使用此处包含的信息风险自负。所有商标均属于龙沙公司或其附属公司或其各自第三方所有，并且仅用于信息目的。本白皮书中描述的产品、方法和流程可能受到一项或多项已授权专利或专利申请的保护。欲获取完整列表，请访问lonza.com/ip。© 2026 龙沙公司 版本号 v 1.0.0 05-2026