核心观点
- HYBIT 测试方法概述: HYBIT 测试提供了一种非脊椎动物水生环境生物富集测试方法，与 OECD TG 305 部分一中的概念尽可能接近。
- 测试方法类型: 除了常用的流经式模式，本指南还允许半静态模式作为选项，两种模式均经过国际环试验验证。
- 适用范围: 水生暴露测试最适用于 log KOW 值在 1.5 到 6.0 之间的有机化学品，但也可以用于 log KOW > 6.0 的高疏水性化学品，前提是可以证明其在水中具有稳定和完全溶解的浓度。
- 测试原理: 测试包括暴露（吸收）和暴露后（消除）两个阶段。在吸收阶段，将一群 H. azteca（约 1200-1500 只雄性甲壳类动物）在一种或多种选定的浓度下暴露于测试化学品中，然后将它们转移到不含测试化学品的中性介质中进行消除阶段。
- 生物富集潜力参数: 描述生物富集潜力的参数包括吸收速率常数 (k1)、消除速率常数 (k2)、稳态生物富集因子 (BCFSS) 和动力学生物富集因子 (BCFK)。
- 测试方法选择: 是否选择流经式或半静态暴露实验应根据在吸收期间在水相中保持稳定暴露浓度（在测量值的平均值 ±20% 以内）的可行性来决定。
- 测试化学品信息: 在进行生物富集测试之前，需要提供有关测试化学品的以下信息：分析方法的验证、水溶性、n-辛醇-水分配系数 (KOW)、水中的测试化学品稳定性、光转化信息、表面张力、蒸汽压、亨利定律常数、生物或非生物降解信息、代谢物信息以及酸解离常数 (pKa)。
- 测试物种: 测试物种为 H. azteca，建议使用雄性个体以避免在测试期间繁殖。
- 测试条件: 建议的光照周期为 16 小时光照：8 小时黑暗，温度范围为 23±2°C。
- 测试浓度: 原则上，对于中性有机化学品，使用单一浓度暴露就足够了，因为预计不会影响测定的生物富集。如果测试的化学品属于此领域之外，或者已知可能存在浓度依赖性，则必须使用两个或多个浓度进行测试。
- 对照: 应包括一个程序水对照，以证明所提供的测试条件适合 H. azteca，确保在整个研究期间有足够的存活率，并获得对照水和甲壳类动物中的测试物质背景浓度。
- 水质量测量: 在整个测试期间，应测量所有测试容器中的溶解氧、总有机碳 (TOC)、总硬度、pH 和温度。
- 采样和分析: 水样在添加 H. azteca 到测试系统之前以及在整个吸收和消除阶段期间采集。H. azteca 在至少五个采样时间进行采样，在至少四个采样时间进行消除阶段采样。
- 结果处理: 吸收曲线通过绘制 H. azteca 中的测试化学品浓度 (CH) 与时间的关系来获得。如果曲线达到平台期，即大致平行于时间轴，并且在最后三次采样中，CH 在足够大的时间间隔内彼此相差 ±20%，并且没有在第一次和最后一次连续分析之间出现显着增加，则计算稳态 BCF (BCFSS)。
- 结果报告: 测试报告应包括测试化学品、分析方法和测试物种的详细信息，以及结果、任何异常情况以及任何其他相关信息。
关键数据
- 测试物种: H. azteca（雄性）
- 建议的光照周期: 16 小时光照：8 小时黑暗
- 建议的温度范围: 23±2°C
- 最低甲壳类动物数量: 每个测试（浓度）至少需要 60 只甲壳类动物
- 吸收阶段持续时间: log KOW <4：3-4 天；log KOW 4-5：4-10 天；log KOW >5：最多 14 天
- 消除阶段持续时间: 至少与吸收阶段一样长，并且应足够长，以允许测试化学品在甲壳类动物体内的负荷减少 ≥95%。
研究结论
- HYBIT 测试是一种有效的评估化学品在水生环境中生物富集潜力的方法。
- 测试方法的选择和实施应遵循本指南中规定的标准操作程序。
- 测试结果应结合其他相关信息进行解释，例如化学品的毒性和降解信息。
