
HPLC-UV-Vis吸收和带电气溶胶检测 膳食补充剂和植物天然产品应用笔记本复杂的样品,强大的色谱分析 对膳食补充剂和植物天然产品的可靠分析对于确保原材料和最终产品的一致质量和安全性至关重要,但是,这些材料的性质会使其分析要求特别高。 本笔记本提供了有关如何将高效液相色谱(HPLC)与带电气溶胶检测,吸收检测或两者结合使用的应用和有用信息的摘要 以满足科学家使用膳食补充剂和植物天然产品的需求。 例如,植物天然产物通常是复杂的混合物。它们的确切成分可能会有所不同的影响遗传、培养条件、掺假、储存条件和加工方法等变量。 膳食补充剂和植物天然产物的色谱分析提出了以下方面的具体挑战: 1.样品制备:各种各样的样本矩阵会影响效率和提取的重现性。2.分离:非常广泛的化学结构将需要不同的色谱方法。3.检测:缺乏发色团的分析物不能被吸收检测器检测到。4.定量:通常没有可用的参考标准。 膳食补充剂 天然产品 术语天然产物可以以许多方式使用。一些应用是特定的,基于FDA对活生物体(细菌、真菌、海洋生物或植物)产生的化合物或物质的定义,其通常具有药理学或生物学活性,并且用于药物发现和药物设计。其他定义更广泛,并且天然产物可以用作总括术语来描述复杂的基于植物的制剂。 美国FDA将膳食补充剂部分定义为“含有膳食的产品”。膳食成分包括维生素、矿物质、氨基酸和草药或植物药,以及其他可用于补充饮食的物质。 膳食补充剂有多种形式,包括片剂,胶囊,粉末,能量棒和液体。 Overview:膳食补充剂和植物天然产品Overview:膳食补充剂和植物天然产品 植物药产品 植物天然产物 植物天然产品是指补充剂,草药,草药,草药,植物制剂,营养保健品,植物药和植物药。植物天然产品以多种形式提供给消费者,包括含有原料或提取材料的胶囊,提取物,茶(通常是在植物中提取的植物原料 FDA将植物药产品定义为“...旨在用于诊断,治愈,缓解,治疗或预防人类疾病...”,并由“...植物材料组成,其中可能包括植物材料,藻类,宏观真菌,或其组合。” 植物衍生药物包括植物药和其他批准的含有天然植物衍生物质和合成或半合成物质混合物的药物。 使用前的热水),tin剂(乙醇提取物)和传统配方,例如中药或阿育吠陀实践中使用的粉末。 全球市场概况 对膳食补充剂的日益增长的需求是由消费者,特别是老龄化人口日益增长的健康问题驱动的。膳食补充剂是营养保健品市场的一个关键部分,与功能性食品和饮料一起。就天然物质而言,悠久的使用历史和更有利的监管环境是植物天然产品市场增长的关键驱动因素。 在生产中使用创新技术并通过监管机构加强质量监测,有助于这些市场的增长和安全药物的交付。 来自bcc Research - Nutraceuticals:至2023年的全球市场。报告代码FOD013G 测量和分析 本应用笔记本专注于高效液相色谱(HPLC)使用两种不同的HPLC/UHPLC检测器-UV-Vis吸光度和带电气溶胶检测(CAD)-用于各种测量当连续使用(UV-Vis然后CAD)时,它们可以显著扩展样品中测量的分析物的范围。 当标准不可用时,使用CAD进行定量 非挥发性,但分析物的响应取决于其发色团结构和用于检测的吸收波长。一种化合物可能在特定吸收波长下表现出强响应,而其他化合物可能仅微弱或根本没有响应。使用单一校准物定量因此,样品中的所有分析物可能导致错误的定量。 相反,非挥发物的CAD响应与分析物的化学结构无关。因此,可以使用单个校准物来定量样品中的所有非挥发性分析物,而无需多个真实的标准。对于半挥发性分析物,智能选择的流动相添加剂在许多情况下可以支持单校准物定量。 然而,CAD响应取决于流动相的有机含量。 这意味着当采用梯度时,响应的均匀性将受到影响。为了使用单校准物定量,在梯度洗脱期间检测器响应的变化必须最小化。这很容易使用二次补充流动柱来实现。这里,逆梯度确保检测器“看到”恒定的流动相组成,从而确保均匀的响应。这样的设置很容易使用实现。ThermoScientific™Vanquish™DuoUHPLC系统,用于逆梯度LC工作流程。 由于盐的形成,可电离化合物的CAD响应可能会受到流动相组成的影响(在某种程度上)。通常,在测量许多膳食补充剂和植物天然产品的分析物组成时,这是一个次要的考虑因素。 流动相的组成进入检测器仍然存在恒定,从而保持响应均匀性 CAD的响应取决于梯度(红色条)期间的流动相组成,相反的梯度克服了梯度(灰色条)对检测器响应的影响。 TN72806:带电气溶胶检测-影响均匀响应的因素TN73449:为什么使用带逆梯度的带电气溶胶检测? SP73026-EN0819C:实现标准自由定量:ThermoScientific带电气溶胶探测器 色谱的集体功率 配置的仪器可满足您的精确测量需求 Sample准备工作分离检测 使用加速溶剂萃取器系统(ASE)自动制备样品 •通过使用升高的压力在萃取溶剂的沸点以上操作,从而允许在高温下快速液体萃取。 在通用和专用HPLC色谱柱之间进行选择 在分离阶段使用的色谱柱的选择可以显著影响所获得的结果的质量,因此是需要考虑的重要因素。 ThermoFisherScientific提供的色谱柱具有广泛的键合相、颗粒大小、颗粒形态和色谱柱尺寸。这些全面的选项旨在满足任何应用需求,以提供最大的分析物分辨率。在根据您的要求选择最合适的LC色谱柱时,需要考虑的一些事项是: •在ThermoScientific™Hypersil™GOLD色谱柱和ThermoScientific™Acclaim™色谱柱中发现的完全多孔颗粒允许复杂样品基质的大进样体积和高分辨率。 •在ThermoScientific™Accucore™色谱柱中发现的表面多孔(实心)颗粒在较小的注射体积和/或在进行UHPLC分离而没有升高的系统背压时提供更大的信噪比特征。 •色谱柱的疏水特性决定了大多数分析物的分离。C18是方法开发中选择的最常见的相,考虑色谱柱上碳负载的疏水保留趋势:C1< C4 < C8 < C18 / C30。 潜在分析物的复杂性和多样性使得膳食补充剂和植物天然产物的分析尤其具有挑战性。 ThermoScientificVanquishHPLC和UHPLC系统甚至可以解决最棘手的分析挑战-它们可靠且始终如一地提供您可以依赖的高质量结果。 ThermoScientificTMVanquishTMFlexUHPLC系统完全灵活的方法开发或快速可靠的UHPLC ThermoScientificTMVanquishTMHorizonUHPLC系统无与伦比的性能和需要高端UHPLC的应用的吞吐量 ThermoScientificTMVanquishTM核心HPLC系统绝对可靠,可实现无忧应用程序 了解更多关于ThermoScientificVanquishHPLC和UHPLC系统 检测:检测器的选择是关键 为您的应用选择最合适的检测技术对于揭示样品中所有感兴趣的成分至关重要。VanquishHPLC和UHPLC平台提供了广泛的检测功能,可以轻松集成和组合以满足您的分析需求。 虽然这里的重点是UV-Vis吸光度和带电气溶胶探测器,但完整系列的探测器可用于膳食补充剂和植物天然产品的分析,包括质谱解决方案。这些使您能够根据具体要求选择和配置确切的设置。 检测:带电气溶胶探测器 先进的仪器对于使用带电气溶胶检测进行成功的样品分析至关重要 ThermoScientificHPLC和UHPLC系统与ThermoScientific带电气溶胶探测器(CAD)、先进的色谱柱技术和成熟的分析方法相结合,提供精确的自动化和先进的数据处理,帮助您: •表征许多类别的化合物•分析各种样品类型中的化合物•轮廓或定量分析物 Thermo Scientific Vanquish带电气溶胶探测器和Thermo Scientific ™ Corona ™ Veo ™带电气溶胶探测器提供: •操作简单、直观•宽线性和动态范围•亚纳克灵敏度•使用单个雾化器覆盖微流HPLC和UHPLC应用的方法灵活性•可调节蒸发温度以优化信噪比 检测:UV-Vis ThermoScientificVanquish二极管阵列探测器(DAD),支持3D场检测和多波长探测器(MWD)设计用于 宽光谱范围和多个可编程探测器优化参数满足具有挑战性的方法开发要求和应用需求。 ThermoScientificUV-Vis检测器具有多个优点,包括出色的噪声,漂移和线性性能,可支持宽操作范围和痕量化合物检测。这些吸光度检测器易于操作,并通过覆盖UV和Vis范围的光简化了样品分析。 产品规格表:Vanquish可变波长探测器产品规格表:Vanquish二极管阵列探测器和多波长探测器 补充剂和原材料的认证 以前研究中的特征材料。为了解决 基于HPLC的方法用于评估植物天然产物,包括非靶向和靶向代谢组学方法。这里介绍了一种非靶向HPLC代谢组学方法,该方法使用主成分分析来区分真实样品和掺杂物,基于其代谢模式的差异。 补充乙酰肉碱和硫辛酸 乙酰肉碱由人体自然产生,也被用作膳食补充剂。它在血液中被血浆酯酶分解为肉碱,肉碱作为将脂肪酸输送到线粒体进行能量代谢的系统的一部分。 硫辛酸是参与有氧代谢的几种酶复合物的必需辅因子。硫辛酸不仅在许多食物中天然存在,也在体内形成,还可以作为补充剂服用。 乙酰肉碱和硫辛酸都是高极性化合物,它们不能很好地保留在RP - HPLC柱上。这里介绍的是使用Acclaim Triity P1色谱柱同时测量膳食补充剂中乙酰肉碱和硫辛酸的HPLC - UV方法。Acclaim Triity P1的阳离子交换,阴离子交换和反相保留机制使其成为该应用的理想色谱柱。 马兜铃属包括几种被称为发草或荷兰人烟斗的植物。一种是马兜铃角膜炎,被古埃及人,希腊人和罗马人用作药用植物,用于治疗哮喘,打嗝,痉挛,疼痛和驱逐胎后。在传统中药中,马兜铃属用于治疗关节炎和水肿。含有马兜铃的补充剂也被推广,以帮助减肥。 马兜铃属物种现在被认为是有毒的。有报道称,人们在食用中国的某些减肥补充剂后患有肾炎和快速肾衰竭。负责的毒素很可能是马兜铃酸(AA I和AA II)。这些是有效的致癌物因此,FDA已发出警告,禁止食用含AA的补充剂。 这里介绍的是HPLC-CAD方法,用于测定补充剂中的AA1和AA2。 HPLC色谱柱:Thermo Scientific Accucore C18,2.6 μ m, 2.1 x 150 mm流动相A:在10mM中的0.1%甲酸甲酸铵流动相B:乙腈检测器中的0.1%甲酸:带电气溶胶 甜艾草(青蒿)是一种用于中药的植物,是药物青蒿素的来源。青蒿素及其半合成衍生物用于治疗疟疾和寄生虫感染。 青蒿素不含发色团。低波长UV吸光度检测缺乏灵敏度并且容易受到色谱干扰。青蒿素是HPLC - CAD分析的理想候选物。 Withaniasomnifera是茄属植物家族的成员,通常被称为印度冬季樱桃,毒醋栗或印度人参。它被称为ashwagandha,在阿育吠陀医学中用于治疗压力,提高注意力和增加能量。 Actaea racemosa(同义词Cimicifuga racemose),也称为黑升麻,黑布根,黑蛇形或仙女蜡烛,是一种原产于北美东部的开花植物。黑升麻被美洲原住民用于治疗妇科和 其他疾病,而欧洲定居者用它来治疗蛇咬伤,肺部发炎和分娩疼痛。今天,它被视为解决妇科问题的补充。 活性成分被认为是三萜苷,包括肌动蛋白,cimiffugoside和相关化合物。提取物可以通过HPLC-UV检测进行分析, 但是这种方法是有限的,因为三萜苷含有弱发色团。使用HPLC - CAD获得更全面和灵敏的分析。 这里提供了一种用于黑色升麻提取物的HPLC-CAD分析的方法。 色谱柱:Thermo Scientific Ac