间充质干细胞产品药学研究与评价技术指导原则（征求意见稿）

目录 一、前言.........................................................................................1 二、适用范围..................................................................................2 三、一般原则..................................................................................2 （一）生产用物料.................................31.起始原材料..................................32.其他原辅料..................................5（二）生产工艺...................................61.批次批量要求................................72.工艺控制要求................................83.细胞库研究和检定要求........................9（三）质量研究和质量标准.........................12（四）稳定性研究................................16 五、变更研究与评价考虑............................................................16 （一）关键原材料变更.............................16（二）生产场地和生产工艺变更.....................17（三）细胞库变更................................18 六、参考文献................................................................................18 七、名词解释................................................................................19 一、前言 间充质干细胞（mesenchymalstemcell，MSC）产品一般是指以MSC为主要活性成分，可能通过旁分泌、迁移效应、分化潜能，以及与驻留微环境的相互作用等，实现免疫调节和组织修复等功能的一类自体或异体细胞治疗药品。 间充质干细胞产品（以下简称为“MSC产品”）具有起始6原材料多样性和异质性、生产工艺差异性和动态性、质量属7性复杂性和波动性、表征手段有限性、以及分析方法局限性8等特点，因此此类产品质量控制难度大，为产品成药性研究9和全生命周期持续进行质量优化提升带来较大挑战。10 为指导申请人/持有人科学规范地开展MSC产品的药学研究与评价，根据《中华人民共和国药品管理法》、《药品注册管理办法》等相关法律法规制定本技术指导原则。本指导原则适用于按照药品研发和申报路径的MSC产品，并基于MSC产品的研发现状和当前科学认知起草，主要关注MSC产品注册上市申请阶段药学研究与评价的技术要求，以促进此类产品的规范研究与创新发展。 因不同产品在设计思路和临床应用方面可能存在差异，具体品种的药学研究亦可参考已发布的其他细胞和基因治疗产品相关的药学技术指导原则，并遵循具体问题具体分析的原则。随着科学研究与技术的进步，以及行业实践的发展，本指导原则的内容将不断完善和适时更新。 二、适用范围 本指导原则主要适用于异体MSC产品全过程的质量研究与质量控制，包括对人体组织分离的原代细胞经体外培养扩增获得的MSC产品，对多能干细胞（pluripotentstem cell，PSC）系/库进行诱导分化获得的MSC产品，以及对MSC进行基因修饰获得的功能增强型MSC产品等。对于自体MSC产品，因其在免疫相容性设计、污染和交叉污染风险控制、生产工艺和质量标准等方面可能与异体MSC产品存在一定差异，经评估可适当参考。 本指导原则适用于按照药品开发和管理的MSC产品上市申请阶段的药学研究与评价，其他符合药品属性的基于通用 型 细 胞的 再 生 医 学产 品，如MSC来 源 的 细 胞 外 囊 泡（Extracellular vesicle，EV）的细胞部分，PSC分化获得的神经细胞、胰岛细胞、心肌细胞、类器官、组织工程产品等的细胞部分，如适用也可适当参考。 三、一般原则 MSC产品的药学研究与评价应符合《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）的要求，人体用药的制备和生产应符合《药品生产质量管理规范（2010年修订）》及《临床试验用药品（试行）》附录的要求。MSC产品的制备通常起始于多种人体组织，需符合国家伦理、人类遗传资源管理、生物安全等相关法律法规的要求。 MSC产品全过程的药学研究与评价应贯穿药物研发全过程，与研发阶段相适应。申报临床试验阶段，应重点关注安全性风险控制以及注册临床批次与非临床研究批次的质量可比性，注册临床批次的质量不得劣于非临床研究批次。临床试验期间，应进一步完善生产工艺和质量研究，持续积累对产品和工艺的足够认识和深入理解，明确产品关键质量属性，尤其关注“功能标签”的确证。上市申请阶段，应基于对药物研发全过程的科学风险评估，结合产品设计、细胞特性、工艺特点以及变更计划等逐步建立和完善整体的质量控制策略。整体质量控制策略应包括对生产用物料、生产工艺、质量标准、稳定性等方面的全面、可靠控制。 MSC产品质量控制的难度大，鼓励符合MSC产品生产工艺和质量研究特点的新技术、新方法、新设备等的开发应用，以提高产品批间质量一致性和可控性。建议将既往积累的先验经验与系统化的知识管理理念融入新情境下的质量研究和质量控制，以科学、规范的方式整合现有认知，并加强新情境下的沟通交流。 四、药学研究与评价技术要求 （一）生产用物料 1.起始原材料 组织来源：MSC产品通常起始于多种人体组织，如脐带、骨髓、血液、囊胚，进而制备细胞系或细胞库进行生产。由 于不同人体组织/细胞来源产品的生产产能及工艺质量控制等存在差异，建议结合风险获益情况合理选择组织来源，优先选择风险较低、控制良好的人体组织。 供者筛查：人体组织/细胞获取前，需参考《人源干细胞产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》对供者进行筛查，明确供者种族和地域来源，制定合理的、可溯源的供者筛查程序和标准。 合理的供者筛查程序和标准是控制外源因子引入和/或传播的基础，也是有效保证MSC产品批间质量可控性的重要环节。筛查内容应涵盖供者健康状况（如年龄范围、性别、体重指数等）与病史信息（传染病史、遗传病史、不良孕产史等）。建议根据组织类型、供者健康状况及其旅居史等完善病原微生物检测项目，明确控制标准。为控制病原微生物检测窗口期的假阴性风险，建议基于各病原体特点和检测方法等合理设置检测间隔；对于血源筛查项目，一般建议参考单采血浆检疫期的要求，设定检测间隔不低于90天。 组织采集、运输和入厂接收：为了确保人体组织的质量不会对临床试验用样品的质量产生明显不良影响，建议选择具有相关资质的医疗机构进行合作，负责生物材料的采集工作。建议申请人对合作医疗机构进行质量评估、审核和筛选，签订质量协议。 申请人需参考国内外相关规范要求建立生物材料的质 量管理体系及标准化操作规程，明确采集参数（如组织大小、体积、密度、储存液成分等）和操作细节，重点关注污染和交叉污染的防控措施，如严格的消毒程序、无菌保存液的使用、必要的鉴别与微生物检测等，可通过建立采集操作文件等方式确保组织采集的可靠性。 应开展适宜的运输稳定性研究，以支持人体组织/细胞的冷链运输环节，需对组织从获取到入厂的时间窗口进行确认，以保证组织在运输过程中的新鲜度和细胞活性。人体组织/细胞作为起始原材料，其入厂标准一般应至少满足无菌、无支原体、低内毒素等基本质量要求，为后续生产工艺提供符合要求的起始原材料。 2.其他原辅料 MSC产品生产中涉及的其他原材料复杂多样，可能包括药用级别和非药用级别、化学小分子试剂和生物大分子试剂、核酸、活病毒等，建议加强供应商审核和管理，参考《中国药典》和相关指导原则建立风险相适应的质量控制标准。 MSC产品的生产用培养基中可能添加胎牛血清、人AB血清等人源/动物源性原材料，或使用血清替代物等含人源/动物源性成分的原材料，外源病毒污染风险较高。应进行充分的TSE/BSE风险评估，选择非疫区、供应稳定、质量标准级别高的物料来源，并结合物料生产工艺和质量控制措施等评估病毒安全性风险，进而制定科学合理的内控策略。如可 行，建议传代扩增阶段避免使用人源/动物源血清，若确需使111用，建议参照9CFR要求完善牛源病毒的检测和控制，并制定112合理的牛血清白蛋白残留标准。113 考虑到抗生素残留有安全性风险（如过敏反应）和耐药菌传播等环境问题，对于MSC产品，非必要不使用抗生素，不得使用β-内酰胺类抗生素。其中，诱导分化获得的MSC产品在种子构建阶段应避免使用氨苄抗性基因。如生产中不得不使用微量的其他抗生素，应符合《中国药典》的相关要求，并明确抗生素选择依据、使用量、检测方法及残留水平，检测方法应经过充分方法学验证。临床应用应制定预防过敏反应的相关措施，如说明书中标注“含微量抗生素残留”，并列出具体种类或在临床试验中纳入过敏反应监测指标（如血清类胰蛋白酶、组胺水平等）。建议后续持续进行无抗生素替代工艺路线的开发。 MSC产品可能添加多种制剂辅料，建议关注辅料的风险识别和控制。在制剂开发期间完善辅料筛选研究，尽可能选择风险低、级别高、质量控制体系完善的辅料，优化辅料用量，确保制剂辅料使用的必要性、科学性和合理性。 （二）生产工艺 MSC产品通常经过组织分离、体外培养、诱导分化、基因修饰、配制灌装、低温冻存等步骤制成，不同生产工艺可能导致产品引入的风险程度存在差异。应遵循QbD的理念进 行生产工艺开发，明确目标产品质量概况（quality targetproduct profile,QTPP），对影响产品质量的生产工艺进行研究和验证，并基于工艺理解、科学原理和质量风险管理，确定生产工艺控制策略。 1.批次批量要求 MSC产品生产中，同一生产周期中生产出来的一定数量的产品定义为1批。由于供者年龄、性别、健康状况等可能显著影响产品质量，因此原则上同一批次MSC产品应来源于单一供者同一时期采集的组织。临床试验期间关注多个不同供者及同一供者不同时期（如适用）来源组织对产品质量、安全性和有效性的影响，合理收紧供者筛选标准。 MSC为贴壁细胞，工艺设备通常为细胞培养瓶、细胞工厂、3D微载体等，配合不同自动化水平（如手动操作、全封闭自动化系统）和培养体系，由于不同设备的物理特性（如接触面积、粘附基质）、环境控制能力（如氧张力、剪切力）、操作差异（如培养基质、基因修饰条件、消化方法）等的不同，细胞在扩增过程中可能表现出显著的生长差异和异质性（如形态、表面标志物、分化潜能、分泌组特征、基因组稳定性等）。在批量放大等工艺变更过程中，这些差异可能被进一步放大，造成产品质量不均一或不稳定的潜在风险。因此，MSC产品临床试验用药需达到一定的批量要求，以满足临床试验期间质量和稳定性研究、临床用药等需求。临床试 验期间合理设计和开展批量放大研究及生产产能研究，加强风险评估，结合生产工艺变更的相关要求完善研究与验证。 2.工艺控制要求 MSC产品的工艺控制策略应包括工艺设计控制、工艺参数控制、工艺过程控制和工艺验证控制，申报临床阶段应明确生产工艺流程和参数，临床期间逐步完善关键工艺参数和过程控制。 MSC产品的临床使用情况可能存在一定特殊性，建议尽量避免或减少在医疗机构对