除菌过滤验证概述

除菌过滤验证概述 Yunshi Zhao (赵云石)ProjectManager ◼法规指南介绍◼验证试验介绍◼实验室及流程介绍 验证 向监管者和内部质量控制人员证明该工艺是：Proof to regulator and to internal quality that thecomponents of the process are： “Establishingdocumented evidencethatprovides a high degree of assurance thata specific process will consistentlyproduce a product meeting itspredetermined specifications and qualityattributes” •Reproducible and robust可重复，可靠 •Perform as intended and described符合预期标准和质量属性•Fully documented and supported by an audit trail充分记录并且审计追踪支持 [1] Guideline on thesterilisationof the medicinal product, active substance, excipient and primarycontainer. EMA/CHMP/CVMP/QWP/850374/2015[2] FDA Guidance for Industry-Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing–Current GoodManufacturing Practice, 2004 Lack of appropriate documented validation will lead to failed inspections and process shut downs缺少必要的验证文件将导致检查不通过和工艺关闭Confidential - Company Proprietary Cytiva 标准及指南 ⚫国内更新的相关法规与标准： 《除菌过滤技术及应用指南》-2018，CFDA/审核查验中心 《化学药品注射剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南（试行）》-2020，NMPA/药品审评中心 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》无菌药品附录（征求意见稿）-2025,NMPA/审核查验中心 除菌过滤技术及应用指南 5除菌过滤验证 5.1除菌过滤验证概述 •本指南所述的除菌过滤验证包含除菌过滤器本身的性能确认和过滤工艺验证两部分。除菌过滤器性能确认和过滤工艺验证，两者很难互相替代，应独立完成。 •除菌过滤器本身的性能确认一般由过滤器生产商完成。主要的确认项目包括微生物截留测试、完整性测试、生物安全测试（毒性测试和内毒素测试）、流速测试、水压测试、多次灭菌测试、可提取物测试、颗粒物释放测试和纤维脱落测试等。 •过滤工艺验证是指针具体的待过滤介质，结合特定的工艺条件而实施的验证过程。 Cytiva•过滤工艺验证一般包括细菌截留试验、化学兼容性试验、可提取物或浸出物试验、安全性评估和吸附评估等内容。如果过滤后，以产品作为润湿介质进行完整性测试，还应进行相关的产品完整性测试验证。Confidential - Company Proprietary Cytiva出厂前验证数据–数据可获得性 物理性质 化学性质 化药注射剂生产所用塑料组件系统相容性研究技术指南 本技术指南适用于化学药品注射剂生产过程中直接接触液体的管路类、滤器类、密封件类、配液袋类等塑料组件系统。 化学药品注射剂生产过程使用的塑料组件系统的相容性风险通常来源于与液体接触后产生的相关浸出物。在化学药品注射剂研究工作中，制剂申请人作为责任主体，应基于风险评估及必要的相容性研究，确认化学药品注射剂生产中使用的塑料组件系统的适用性。 Confidential - Company Proprietary ……申请人也需关注塑料组件系统可能对药液组分产生吸附，注意进行研究。 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》无菌药品附录（征求意见稿） 第一百八十一条：过滤器不得与产品发生反应、释放物质或吸附作用而对产品质量产生不利影响。过滤系统应当最大限度减少微粒的产生，除菌过滤器不得脱落纤维，严禁使用含有石棉的过滤器。第一百八十三条除菌过滤系统的验证应当覆盖最差条件，可根据产品的规格、性质等进行分组，分组的策略应当进行充分评估确认。 第一百八十四条应当尽可能将挑战微生物直接接种在待过滤产品中进行细菌截留试验。如果产品或工艺条件本身可能会影响挑战微生物的存活力，应当提供充足的数据和解释，证明替代产品的适用性和合理性。应当评估细菌截留试验的挑战微生物选择的合理性。 第一百八十六条应当对除菌过滤工艺进行监控，确保过滤参数符合验证。 第一百八十七条除菌过滤器组件应当在使用前灭菌后进行完整性测试（PUPSIT)Confidential - Company Proprietary PUPSIT-药品生产质量管理规范无菌药品附录 •对非最终灭菌产品的过滤器完整性检测要求 2010年修订 2025 NMPA GMP无菌药品附录征求意见稿 第七十五条非最终灭菌产品的过滤除菌应当符合以下要求： 第三节非最终灭菌产品的除菌过滤 （一）可最终灭菌的产品不得以过滤除菌工艺替代最终灭菌工艺。（二）应当采取措施降低过滤除菌的风险。宜安装第二只已灭菌的除菌过滤器再次过滤药液，最终的除菌过滤滤器应当尽可能接近灌装点。 完整性测试。用于药液除菌的除菌过滤器，应当在使用后从外壳中取出前进行完整性测试。应当采用经验证的方法进行完整性测试，依据过滤系统验证确定的标准对测试结果进行判定。 （三）除菌过滤器使用后，必须采用适当的方法立即对其完整性进行检查并记录。常用的方法有起泡点试验、扩散流试验或压力保持。 由于工艺限制（如药液量很少）无法在使用前灭菌后进行完整性测试时，可以在全面风险评估并采取适当控制措施后使用替代方法。Confidential - Company Proprietary 国外的监管预期 Annex 1–Manufacture of SterileMedicinal Products (2022) FDA Aseptic Processing Guidance(2004) EMA, Guideline on the Sterilisation ofthe Medicinal Product, ActiveSubstance, Excipient and PrimaryContainer (2019) “Asterilizing grade filter should bevalidatedto reproducibly remove viablemicroorganisms from the process stream,producing a sterile effluent” “Aseptic processes (and, where applicable,sterilizing processes) should bevalidated” “If the product cannot be sterilised in itsfinal container,solutions or liquids shouldbe sterilised by filtrationthrough a sterilesterilising grade filter(with a nominalpore size of a maximum of 0.22 μ m that hasbeen appropriatelyvalidatedto obtain asterile filtrate)….” “Whatever filter or combination of filters isused,validation should includemicrobiological challenges to simulateworst-case production conditionsfor thematerial to be filtered and integrity testresult of the filters used for the study” “Minimum 107CFU/cm2using a justifiedindicator organism and the actual solution” “The microorganismBrevundimonasdiminuta(ATCC 19146)..is a commonchallenge microorganism for 0.2 μ m ratedfilters because of its small size…” “Filter validation should be conducted usingtheworst-case conditions, such asmaximum filter use time and pressure” ◼法规指南介绍◼验证试验介绍◼实验室及流程介绍 生存性/滤膜冲洗 •实验目的–1.考察缺陷假单胞菌在产品中的存活2.确定适当的产品冲洗方法•实验设计–1.测试菌液分别接种到料液和对照液（如无菌水）2.定时取样检测细菌浓度，时间不低于工艺时间3.冲洗方法的确定•实验结果-1.定性为杀菌性、中度杀菌性、或非杀菌性2.验证冲洗方案 应尽可能将挑战微生物直接接种在药品中进行细菌挑战。但是药品和/或工艺条件本身可能会影响挑战微生物的存活力，因此在进行细菌截留实验之前，需要确认挑战微生物于工艺条件下在药品中的存活情况，以确定合理的细菌挑战方法，也即活度实验（生存性实验）---《除菌过滤技术及应用指南》，NMPA, 2018年10月Confidential - Company Proprietary 生存性→细菌挑战 细菌截留试验的研究目的是模拟实际生产过滤工艺中的最差条件，过滤含有一定量挑战微生物的产品溶液或者产品替代溶液，以确认除菌过滤器的微生物截留能力。---《除菌过滤技术及应用指南》，NMPA, 2018年10月Confidential - Company Proprietary 细菌挑战 试验设计（3+1） •3个实验膜片-全部裁剪自滤芯生产所用的滤膜-其中至少一个为低限规格（即“最恶劣条件”）•1个对照膜片（0.45μm）-确认试验微生物能够穿透0.45微米过滤器 试验结果 •3个待测过滤器下游的截留滤膜无细菌生长•对照过滤器下游的截留滤膜有细菌生长•模拟“最恶劣”工艺条件•挑战水平1 x 107cfu/cm2 微生物截留试验中所用的滤膜必须和实际生产中所用过滤器材质完全相同，并应包括多个批次（通常三个批次）。其中至少应有一个批次为低起泡点（低规格）滤膜。挑战微生物的尺寸需要能够穿透过0.45微米的滤膜，以证明它培养到合适的大小和浓度。Confidential - Company Proprietary ---《除菌过滤技术及应用指南》 兼容性 确认过滤器是否与产品兼容 •包含过滤器（eg.膜、网罩、外壳等）•模拟最差的工艺参数•通过完整性检测判断是否兼容 “当考虑化学兼容性时，重要的是应包含过滤器的全部组成...” “完整性检测是和细菌挑战试验关联的物理测试方法，是一种兼容性测试的方法”---PDA Technical Report No. 26（2008）“化学兼容性试验应涵盖整个过滤装置，不只是滤膜……..”---《除菌过滤技