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Dépistage à court terme de l’activité del’hormone juvénile utilisantDaphniamagna(JHASA) 25 juin 2024Lignes directrices de l’OCDE pour lesessais de produits chimiques OECD/OCDEL'OCDE autorise l'utilisation de ce contenu aux conditions décrites sur lesite :http://www.oecd.org/fr/conditionsdutilisation.1LIGNE DIRECTRICE DE L’OCDE POUR LES ESSAISDE PRODUITS CHIMIQUESNote : À compter du 15 janvier 2025, le titre de la Ligne directrice n° 253, "Essai n°253 : Dépistageà court terme de l’activité de l’hormone juvénile surDaphnia magna", a été remplacé par "Essain° 253 : Dépistage à court terme de l'activité de l’hormone juvénile utilisantDaphnia magnaDépistage à court terme de l’activité de l’hormone juvénileutilisantDaphniamagna(JHASA)La présente Ligne directrice (LD) décrit un essai de dépistage à court terme de l’activitéde l’hormone juvénile (JH) faisant appel àDaphniamagnaen vue de détecter les produitschimiques ayant un potentiel d’activité analogue à l’hormone juvénile. L’essai JHASA est unessai de dépistage conçu pour évaluer la production de descendants mâles chez les daphniesd’origine parthénogénétique, comme décrit à l’Annexe7 de la LD211 de l’OCDE (Daphniamagna, essai de reproduction). La méthode JHASA est placée au niveau3 du cadreconceptuel de l’OCDE pour les essais concernant les perturbateurs endocriniens dans ledocument-guide150 (1) pour générer des informations mécanistiques et n’est pas destinée àdéterminer des valeurs de toxicité (c’est-à-dire la concentration sans effet observé [CSEO] oula concentration avec effet de x% [CEx]) pour l’évaluation des risques, à moins d’avoir unecourbe concentration-réponse basée sur plus de trois niveaux de traitement.Le concept de la méthode JHASA s’appuie sur les études de la production dedescendants mâles chez les daphnies d’origine parthénogénétique, qui est régulée par la voiede signalisation de l’hormone juvénile (2, 3). La production de descendants mâles estgénéralement connue pour survenir sous l’effet de stimuli environnementaux tels que leraccourcissement de la photopériode, la diminution de la température, la réduction de laquantité de nourriture ainsi que l’augmentation de la densité de population (4-6).Cependant,la production de descendants mâles est également induite par l’exposition à des hormonesjuvéniles naturelles de crustacés et d’insectes (farnésoate de méthyle pour les crustacés etJH I, II et III pour les insectes) et à des analogues d’hormones juvéniles comme les régulateursde croissance d’insectes (p.ex. hydroprène, pyriproxyfène, fénoxycarbe) (7-10) et pourraientmener à des effets pertinents au niveau d’une population (11). Pour utiliser cette productionde descendants mâles comme moyensupplémentaire de détecter les produits chimiquesayant une activité d’hormone juvénile, une étude de validation interlaboratoire a été menée(12) et l’évaluation de la production de descendants mâles a été ajoutée comme mesure © OCDE (2024)(JHASA)".INTRODUCTION1.2. OECD/OCDE2optionnellede l’effet observéàl’Annexe7 de la LD211(Daphnia magna,essai dereproduction) en 2008 (13).L’Annexe7 de la LD211 peut fournir suffisamment de données pour l’évaluation desdangers et des risques; toutefois, c’est un essai qui nécessite des ressources et des coûtssupplémentaires afin d’identifier le sexe de toute la descendance produite pendant 21jours.L’essai de dépistage à court terme de l’activité de l’hormone juvénile faisant appel àDaphniamagna(JHASA) a donc été mis au point pour raccourcir la durée de l’essai de 21jours selonla méthode de l’Annexe7 de la LD211 à 7jours environavec la méthode JHASA (14-16).Sachant que la détermination du sexe de la descendance a lieu pendant la période critiquedu développement des oocystes dans l’ovaire, approximativement 7 à 10heures avantl’ovulation dans la chambre incubatrice (17), la méthode JHASA commence l’exposition chezdes femelles adultes (p.ex. âgées de 10 à 17 jours) et n’observe la descendance qu’à partirde la deuxième portée après l’exposition. La première portée dans la chambre incubatrice audébut de l’essai n’est pas inclusedans l’observation car son sexe a déjà été déterminé avantPRINCIPE DE L’ESSAILes femelles adultes(animal parent) ayant des embryons en développement dansleurs chambres incubatrice sont exposées à au moins trois concentrations du produit chimiqued’essai et à un témoin de l’eau (et, si nécessaire, à un témoin solvant). La durée de l’essai estde 7jours environ, jusqu’à ce que les daphnies soumises à l’essai se soient reproduites unedeuxième fois après l’exposition. La durée de l’essai peut être étendue jusqu’à ce que toutesles daphnies survivantes produisent la deuxième portée (voir la section «Durée» pour plusd’information). Dix récipients ou réplicats par traitement sont utilisés (chaque récipientcontenant 1femelle adulte). On compte le nombre de descendants mâles et femelles de ladeuxième portée. L’identification du sexe des descendants estréalisée par une observationmacroscopique de la première antenne,